• 1. 天津医科大学第二医院检验科 300211;
  • 2. 天津医科大学总医院检验科 300052;
  • 3. 天津医科大学总医院眼科 300052;
导出 下载 收藏 扫码 引用

目的 初步探讨MMP-9抑制剂阻断RPE细胞表面CD73脱落,防治实验性自身免疫葡萄膜炎(EAU)的机制。方法 体外培养分离自野生型C57BL/6小鼠及CD73基因敲除(CD73-/-)小鼠的RPE细胞,以脂多糖及TNF-α共同干预,诱导RPE表面CD73脱落。依据是否同时加入MMP-9抑制剂CTK8G1150(终浓度5.0 μmol/L),将两种小鼠培养的RPE细胞分别设为MMP-9抑制剂干预组及无干预对照组。每组细胞给予溶媒、1 μmol/L 单磷酸腺苷(AMP)、1 μmol/L AMP 及3 μmol/L 5'-α,β-亚甲基-二磷酸腺苷(APCP)(AMP+ APCP)进行干预。氚化胸苷掺入法检测不同组别RPE细胞对CD4+ T细胞增生的刺激作用。分别以野生型B6小鼠及CD73-/-小鼠为受体,过继免疫诱发EAU。受体小鼠分别随机分为MMP-9抑制剂干预组及未干预对照组,于过继免疫后4、7、10 d视网膜下腔分别注射CTK8G1150或溶媒。实时定量PCR(RT-PCR)、Western blot法检测受体小鼠RPE细胞中CD73 mRNA及蛋白表达。组间比较采用单因素方差分析。结果 刺激方式为AMP时,C57BL/6 MMP-9抑制剂干预组CD4+ T细胞的增生能力较无干预组显著下降,差异有统计学意义(F=13.28,P<0.01);溶媒、AMP + APCP时,两组CD4+ T细胞增生能力比较,差异无统计学意义(F=7.78、6.58,P>0.05)。CD73-/-MMP-9抑制剂干预组、无干预组不同刺激方式CD4+ T细胞增生能力比较,差异均无统计学意义(F=5.24、6.12、7.04,P>0.05)。RT-PCR检测结果显示,B6受体小鼠MMP-9抑制剂组、无干预对照组RPE细胞中CD73 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(F=6.54,P>0.05)。Western blot检测结果显示,B6受体小鼠MMP-9抑制剂组RPE细胞中CD73蛋白表达较未干预对照组显著增加,差异有统计学意义(F=15.24,P<0.01)。结论 MMP-9抑制剂阻断RPE细胞表面CD73的脱落对EAU具有保护作用。

引用本文: 周树民, 孔繁强, 陈松. 基质金属蛋白-9抑制剂阻断视网膜色素上皮细胞表面CD73脱落防治实验性自身免疫性葡萄膜炎的初步研究. 中华眼底病杂志, 2020, 36(4): 289-294. doi: 10.3760/cma.j.cn511434-20180502-00141 复制

  • 上一篇

    单眼视网膜静脉阻塞患者对侧眼黄斑区血流密度和中心凹无血管区面积观察
  • 下一篇

    低浓度氯喹保护成年小鼠视网膜神经节细胞抵抗N-甲基-D-天冬氨酸的兴奋性毒性作用