• 1. 510060 广州,中山大学中山眼科中心 眼科学国家重点实验室2. 中山大学中山眼科中心海南眼科医院;
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目的  观察人玻璃体液体外培养诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞间质转分化作用。 方法  将3~5代传代人RPE细胞分为普通培养组和玻璃体液培养组,分别应用普通培养液和25%玻璃体液进行培养。采用相差显微镜观察两组细胞形态变化,细胞爬片检测肌动蛋白细胞骨架的变化。分别用细胞划痕法、Transwell小室侵袭法及Ⅰ型胶原凝胶收缩实验检测细胞迁移、侵袭及收缩力的变化。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测 alpha;-平滑肌肌动蛋白( alpha;-SMA)和Snail1 mRNA的表达。 结果  相差显微镜观察发现,普通培养组细胞保持扁平形态,细胞接触广泛;玻璃体液培养组细胞一端呈扇形,另一端呈锥形拖尾形或梭形,细胞生长呈彼此分离的方式。细胞爬片结果显示,普通培养组肌动蛋白骨架主要分布于RPE细胞周边部,形如细胞周边的条带状;玻璃体液培养组肌动蛋白纤维在细胞的一端重排,形成扇形扁平状伪足突起,而在细胞另一端形成锥形拖尾改变。玻璃体液培养组与普通培养组比较,RPE迁移及侵袭能力显著增强(t=14.190、22.630)、细胞收缩能力显著下降(t=6.221),差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,玻璃体液培养组与普通培养组比较,Snail1 mRNA表达显著上升(t=3.218,P=0.032), alpha;-SMA mRNA表达显著下降(t=3.990,P=0.016),差异均有统计学意义。 结论  玻璃体液培养可诱导RPE细胞间质转分化。这一作用通过增强RPE细胞迁移及侵袭能力,抑制RPE细胞收缩力;提高RPE细胞Snail1 mRNA表达,下调 alpha;-SMA mRNA表达实现。

引用本文: 黄雄高,张少冲,魏雁涛,马海智,张钊填,张婷. 玻璃体液诱导视网膜色素上皮细胞间质转分化作用. 中华眼底病杂志, 2013, 29(2): 166-170. doi: 复制