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目的  观察川芎嗪(TMP)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧相关因子表达的影响。方法  体外培养HUVECs,取2~5代细胞进行实验。将HUVECs分为对照组、氯化钴(CoCl2)缺氧组及50、100、200  mu;mol/L TMP药物处理组。对照组不作任何处理。CoCl2缺氧组利用150  mu;mol/L的CoCl2干预HUVECs 4 h;50、100、200  mu;mol/L TMP药物处理组在CoCl2干预HUVECs 4 h后,再加入不同浓度TMP继续培养8 h。分别提取各组细胞RNA和总蛋白,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脯氨酰羟化酶2(PHD2)、缺氧诱导因子-1 alpha;(HIF-1 alpha;)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白的表达。结果 实时RT-PCR检测结果 显示,与对照组比较,CoCl2缺氧组PHD2 mRNA表达下降(t=3.734),HIF-1 alpha;和VEGF mRNA表达升高(t=4.589、3.926),差异均有统计学意义(P<0.05)。50、100、200  mu;mol/L TMP药物处理组分别与CoCl2缺氧组比较,PHD2 mRNA表达均升高(t=3.286、3.617、3.886),差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1 alpha; mRNA表达均无明显变化(t=1.025、0.726、-1.386),差异无统计学意义(P>0.05);VEGF mRNA表达均有所下降,但50  mu;mol/L TMP药物处理组与之差异无统计学意义(t=1.696,P>0.05),100、200  mu;mol/L TMP药物处理组与之差异有统计学意义(t=2.974、3.492,P<0.05)。Western blot检测结果 显示,与对照组比较,CoCl2缺氧组PHD2蛋白表达下降,差异有统计学意义(t=3.122,P<0.05);HIF-1 alpha;及VEGF蛋白表达均有不同程度升高,差异有统计学意义(t=3.778、3.257,P<0.05)。50、100、200  mu;mol/L TMP药物处理组分别与CoCl2缺氧组比较,PHD2 蛋白表达均升高(t=2.813、3.026、3.078),差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1 alpha;、VEGF蛋白表达均有所下降,但50  mu;mol/L TMP药物处理组与之差异无统计学意义(t=2.056、1.986,P>0.05),100  mu;mol/L TMP药物处理组(t=3.058、2.976)及200  mu;mol/L TMP药物处理组(t=3.828、3.136)与之差异有统计学意义(P<0.05)。结论  TMP能上调缺氧HUVECs中PHD2 mRNA和蛋白的表达,下调HIF-1 alpha;蛋白、VEGF mRNA和蛋白的表达。

引用本文: 梁小玲,杨诚,周焕娇,魏丽清,林佩蓉,杨璐. 川芎嗪对人脐静脉内皮细胞缺氧相关因子表达的影响. 中华眼底病杂志, 2013, 29(3): 284-289. doi: 复制