华西医学期刊出版社
作者
  • 标题
  • 作者
  • 关键词
  • 摘要
高级搜索
高级搜索

搜索

找到 作者 包含"何广辉" 11条结果
  • 阿托伐他汀对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞CXC趋化因子受体4表达及迁移能力的影响

    目的观察不同浓度阿托伐他汀(ATV)对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)中 CXC趋化因子受体4(CXCR4)表达及迁移能力的影响。方法分离培养鉴定大鼠BMSC。将第4~6代细胞分为对照组和ATV处理0.1 nmol/L组、1.0 nmol/L组、10.0 nmol/L组、100.0 nmol/L组、1 000.0 nmol/L组。ATV处理12 h后,细胞免疫荧光法、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中CXCR4蛋白表达;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞中CXCR4 mRNA表达;Transwell小室法检测细胞迁移能力。组间细胞中mRNA、蛋白表达和细胞迁移能力比较行独立样本t检验。结果细胞免疫荧光法检测结果显示,1.0 nmol/L组、10.0 nmol/L组细胞中CXCR4蛋白表达量较对照组、0.1 nmol/L组、100.0 nmol/L组、1 000.0 nmol/L组明显增高;RT-PCR、Western blot检测结果显示,10.0 nmol/L组细胞中CXCR4 mARNA、蛋白表达均较1.0 nmol/L组和对照组明显增高,差异有统计学意义(FmARNA=20.36,P=0.005;F蛋白=33.17,P=0.009);Transwell小室法检测结果显示,10.0 nmol/L组细胞迁移能力较1.0 nmol/L和对照组明显提高,差异有统计学意义(F=43.77,P=0.000)。结论较低浓度ATV可呈剂量依赖性促进体外培养的BMSC中CXCR4表达并提高其迁移能力。

    发表时间:2018-11-16 03:02 导出 下载 收藏 扫码
  • 无明显糖尿病视网膜病变的 2 型糖尿病患者黄斑区微血管改变的光相干断层扫描血管成像观察

    目的 观察眼底无明显糖尿病视网膜病变(DR)的 2 型糖尿病患者黄斑区微血管改变的光相干断层扫描血管成像(OCTA)特征。 方法 前瞻性临床病例对照研究。经散瞳检查明确眼底无明显DR的糖尿病患者22例43只眼(糖尿病组)及同期年龄、性别与之匹配的健康体检者20例40只眼(正常对照组)纳入研究。所有受检者均行OCTA检查,选择视网膜血流成像模式,黄斑区扫描范围3 mm×3 mm、6 mm×6 mm,扫描信号强度指标>45,横向扫描和纵向扫描各需3 s。采用系统内置分析软件测量分析浅层毛细血管层图像中黄斑区扫描范围3 mm×3 mm内黄斑中心凹无血管区(FAZ)面积及平均血管密度;同时观察FAZ旁1 mm直径范围内的毛细血管无灌注区、微动脉瘤及其他微血管异常改变。 结果 糖尿病组患眼和对照组受检眼FAZ平均面积分别为(0.397±0.141)、(0.253±0.112)mm2;平均血管密度分别为(44.6±0.62)%、(48.6±0.58)%。糖尿病组患眼FAZ平均面积较正常对照组受检眼明显扩大,差异有统计学意义(t=1.017,P<0.05);但两组受检眼平均血管密度比较,差异无统计学意义(t=1.499,P>0.05)。正常对照组受检眼FAZ呈蛛网样形态,拱环形态规则。糖尿病组患眼可观察到FAZ旁毛细血管无灌注区、拱环形态异常、微动脉瘤、血管走形纡曲等表现。糖尿病组患眼中存在FAZ旁毛细血管无灌注区(χ2=4.542)及微动脉瘤(χ2=5.183)比例明显大于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 OCTA可在 2 型糖尿病患者尚未出现明显DR之前观察到黄斑区FAZ面积扩大、FAZ旁毛细血管无灌注区、拱环形态异常、微动脉瘤、血管走形纡曲等微血管异常改变。

    发表时间: 导出 下载 收藏 扫码
  • 蓝光诱导人视网膜色素上皮细胞分泌外泌体与核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白炎性体的相关性研究

    目的观察蓝光诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞外泌体对核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白(NLRP3)炎性体相关因子表达的影响。方法人RPE细胞株贴壁细胞分为实验组和对照组。实验组细胞以蓝光照射6 h建立光损伤模型;对照组细胞常规培养。分级低温超速离心法获得两组细胞外泌体,透射电子显微镜观察其形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测两组细胞外泌体表面CD63及白细胞介素(IL)-1β、IL-18、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-1)蛋白相对表达水平。将两组细胞外泌体作用于正常RPE细胞,据此分为蓝光诱导细胞外泌体+实验组、正常细胞外泌体+对照组。培养24 h后,Western blot检测两组细胞外泌体中IL-1β、IL-18、caspase-1蛋白表达;荧光实时定量聚合酶链反应检测两组细胞中NLRP3 mRNA表达。结果实验组细胞发生损伤失去原有形态;外泌体均呈双凹托盘状,直径50~200 nm;实验组细胞外泌体中IL-1β(t=18.04)、IL-18(t=12.55)、caspase-1(t=14.70)蛋白表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。蓝光诱导细胞外泌体+实验组细胞外泌体中IL-1β(t=18.59)、IL-18(t=23.95)、caspase-1(t=35.27)蛋白表达量明显高于正常细胞外泌体+对照组,差异均有统计学意义(P<0.001);蓝光诱导细胞外泌体+实验组、正常细胞外泌体+对照组细胞内NLRP3 mRNA相对表达量分别为1.000±0.069、0.200±0.010,两者比较,差异有统计学意义(t=12.20,P<0.001)。结论蓝光诱导RPE细胞外泌体可使RPE细胞内NLRP3炎性体相关细胞因子IL-1β、IL-18、caspase-1蛋白和NLRP3 mRNA表达上调。

    发表时间:2017-09-19 03:09 导出 下载 收藏 扫码
  • 硅油填充眼眼轴长度浸润式B型超声引导下分段声速测量与光学激光生物仪测量结果比较

    目的 对比观察硅油填充眼眼轴长度(AL)浸润式B型超声引导下分段声速测量与光学激光生物测量仪(Lenstar LS900)测量结果,探讨浸润式B型超声引导下分段声速测量对于硅油填充眼AL测量的准确性。 方法 前瞻性研究。拟行硅油取出、白内障摘除及人工晶状体植入手术的35例患者38只眼纳入研究。所有患眼均合并不同程度的白内障。手术前采用MD-2300S型眼科A型和(或)B型超声行浸润式B型超声引导下分段声速测量法测量患眼AL。AL为角膜厚度、前房深度、晶状体厚度、硅油泡的表观长度、硅油泡下水层厚度的总和。同时采用Lenstar LS900测量患眼AL。所有患眼均顺利完成硅油取出、白内障摘除及人工晶状体植入手术,随诊至手术后3个月均未见并发症发生。手术后3个月,重复应用Lenstar LS900测量患眼AL。对比观察两种测量方法测得AL数据的差异及一致性。 结果 38只眼中,手术前经Lenstar LS900测得AL31只眼;因晶状体混浊、AL超过Lenstar LS900测量范围未能测得AL7只眼。31只眼的平均AL为(24.12±1.70)mm。手术后3个月经Lenstar LS900测得AL36只眼;AL超过Lenstar LS900测量范围未能测得AL 2只眼。36只眼的平均AL为(24.45±1.89)mm。患眼手术前后AL差值为(0.02±0.07)mm,差异无统计学意义(t=1.752,P>0.05)。手术前所有患眼均经浸润式B型超声引导下分段声速测量法测得AL。患眼平均AL为(24.87±2.52)mm。与手术前Lenstar LS900测得AL比较,两者差值为(−0.00±0.09)mm,差异无统计学意义(t=−0.205,P>0.05);与手术后3个月Lenstar LS900测得AL比较,两者差值为(−0.02±0.11)mm,差异无统计学意义(t=−1.280,P>0.05)。两种测量方法测量硅油填充眼的AL具有良好的一致性( \begin{document}$\bar d$\end{document} =−0.003,95%可信区间为−0.19~0.18,P<0.05)。 结论 浸润式B型超声引导下分段声速测量与Lenstar LS900测量对硅油填充眼AL测量结果一致性良好;浸润式B型超声引导下分段声速测量可对硅油填充眼AL进行准确测量。

    发表时间:2017-11-20 02:25 导出 下载 收藏 扫码
  • 人脐带间充质干细胞源性微囊泡对高糖诱导下大鼠视网膜神经节细胞损伤的保护作用及机制

    目的观察探讨人脐带间充质干细胞源性微囊泡(hUMSC-MV)对高糖诱导下大鼠视网膜神经节细胞(RGC)损伤的保护作用及机制。 方法体外培养Sprague-Dawley大鼠RGC;超速离心法分离提取并鉴定hUMSC-MV;观察hUMSC-MV与RGC的内化作用。实验分为正常RGC对照组(A组)、高糖对照组(B组)、正常共培养组(C组)、高糖共培养组(D组)进行。A组细胞正常培养,B组细胞为33 mmol/L葡萄糖培养,C组细胞为hUMSC-MV培养,D组细胞为33 mmol/L葡萄糖、hUMSC-MV共培养。采用细胞计数CCK-8试剂盒测定各组RGC活性;采用膜联蛋白(Annexin)Ⅴ/碘化丙啶(PI)测量各组RGC凋亡率。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组RGC内B-细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bax、半胱天冬蛋白酶(Caspase)-3 mRNA和蛋白的相对表达量。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。 结果超速离心法提取的hUMSC-MV形态为单个或成簇的圆形膜性囊泡样结构,直径约为100~1000 nm。hUMSC-MV表面高表达CD44、CD29、CD73、CD105,阴性表达CD49f、第二型人类白血球抗原、CD34、CD45。大鼠RGC与hUMSCs-MV良好内化。CCK-8及Annexin Ⅴ/PI双染法检测结果显示,B组细胞活性低于A、C、D组(F=107.92,P=0.000),B组细胞凋亡率高于A、C、D组,差异均有统计学意义(F=382.11,P=0.000)。RT-PCR及Western blot检测结果显示,B、D组RGC内Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表达(F=219.79、339.198、1 071.21,P=0.000、0.000、0.000)以及Bcl-2、Bax、裂解的Caspase-3、Caspase-3蛋白表达(F=544.28、295.79、533.18、224.75,P=0.000、0.000、0.000、0.000)均高于A、C组,差异有统计学意义。进一步两两比较,D组RGC内Bcl-2 mRNA和蛋白表达高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);B组Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达以及裂解的Caspase-3蛋白表达均高于D组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论hUMSC-MV可通过降低高糖诱导下大鼠RGC内Bax、Caspase-3的表达及活化,增加Bcl-2表达发挥对RGC损伤的保护作用。

    发表时间:2018-11-16 03:02 导出 下载 收藏 扫码
  • 单眼急性中心性浆液性脉络膜视网膜病变患者双眼脉络膜血管光相干断层扫描血管成像观察

    目的观察单眼急性中心性浆液性脉络膜视网膜病变(CSC)患者双眼黄斑区视网膜结构及脉络膜毛细血管层血流密度变化。方法前瞻性横断面研究。2018年1~3月在山西省眼科医院检查确诊的单眼急性CSC患者24例48只眼(病例组)纳入研究。将病例组患者的患眼、对侧眼分别设为CSC组、对侧眼组,均为24只眼。选取同期年龄、性别匹配的健康志愿者21名21只眼作为正常对照组。采用OCT及OCT血管成像(OCTA)观察受检眼黄斑区结构,并测量黄斑区半径1 mm圆形范围内脉络膜毛细血管层血流密度。采用配对t检验比较三组受检眼之间脉络膜毛细血管层血流密度的差异。结果OCT检查结果显示,CSC组患眼均可见黄斑区神经上皮层浆液性脱离,伴或不伴RPE脱离分别为20、4只眼。对侧眼组24只眼中,厚脉络膜性RPE病变(PPE)13只眼(54.2%)。正常对照组受检眼黄斑区未见视网膜、脉络膜结构异常。OCTA检查结果显示,CSC组、对侧眼组、正常对照组受检眼脉络膜毛细血管层血流密度分别为1.759±0.132、1.924±0.463、1.940±0.033。与对侧眼组、正常对照组受检眼比较,CSC组患眼脉络膜毛细血管层血流密度明显降低,差异有统计学意义(t=6.611、6.474,P=0.000、0.000);对侧眼组、正常对照组受检眼脉络膜毛细血管层血流密度比较,差异无统计学意义(t=1.328,P>0.05);对侧眼组中PPE眼与无RPE改变眼脉络膜毛细血管层血流密度比较,差异无统计学意义(t=0.806,P>0.05)。结论单眼急性CSC患者54.2%的对侧眼存在PPE;患眼脉络膜毛细血管层血流密度较对侧眼及正常眼降低。

    发表时间:2019-01-19 09:03 导出 下载 收藏 扫码
  • 巩膜扣带手术和玻璃体切割手术治疗不同分期家族性渗出性玻璃体视网膜病变合并孔源性视网膜脱离的疗效观察

    目的观察巩膜扣带手术(SBP)和玻璃体切割手术(PPV)治疗不同分期家族性渗出性玻璃体视网膜病变(FEVR)合并孔源性视网膜脱离(RRD)的疗效。 方法临床确诊为FEVR合并RRD的19例患者20只眼纳入研究。其中,FEVR分期3A期7只眼,4A期4只眼,4B期6只眼,5期3只眼。增生性玻璃体视网膜病变(PVR)B级5只眼,C1级2只眼,C2级3只眼,C3级7只眼,D1级3只眼。所有患眼均存在与视网膜脱离相关的视网膜裂孔。根据FEVR分期和PVR分级、视网膜裂孔位置、视网膜脱离范围选择SBP或PPV。20只眼中,行SBP(SBP组)、PPV(PPV组)各10只眼。SBP组、PPV组患眼平均最小分辨角对数(logMAR)最佳矫正视力(BCVA)分别为0.60±0.32、1.81±0.53。SBP组患眼手术中冷冻视网膜裂孔及变性带,巩膜穿刺排放视网膜下液。PPV组患眼手术中彻底清除玻璃体并剥除视网膜前膜,硅油填充。手术后平均随访时间(20.20±7.25)个月。观察两组患眼最终视网膜复位情况、BCVA及不同手术方式的手术次数。 结果两组患眼最终视网膜复位率均为100.0%。SBP组、PPV组患眼平均logMAR BCVA分别为0.34±0.32、1.42±0.64。与手术前平均logMAR BCVA比较,SBP组患眼logMAR BCVA差异有统计学意义(t=2.932,P=0.017);PPV组患眼logMAR BCVA差异无统计学意义(t=1.812,P=0.103)。SBP组、PPV组患眼平均手术次数分别为(1.10±0.32)、(2.20±0.42)次。两组患眼平均手术次数比较,差异有统计学意义(t=6.588,P=0.000)。 结论PVR C3级以下,FEVR分期4A期以下者,SBP视网膜复位率高,手术次数少,视力恢复较好。PVR C3级及以上,FEVR分期4B期及以上,PPV视网膜复位率高,但手术次数多,视力预后较差。

    发表时间:2016-10-21 09:40 导出 下载 收藏 扫码
  • 人脐带间充质干细胞外泌体对蓝光损伤人视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子A表达的影响

    目的观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)外泌体对蓝光损伤后人视网膜色素上皮(RPE)细胞血管内皮生长因子A(VEGF-A)表达的影响。 方法培养hUCMSC,收集上清液,采取梯度超速离心法分离纯化外泌体。应用透射电子显微镜观察外泌体形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测hUCMSC外泌体表面特异性标志蛋白CD63及hUCMSC表面蛋白CD90的表达。取生长良好的人RPE细胞,随机分为正常对照组、光损伤组和hUCMSC外泌体处理组。光损伤组和hUCMSC外泌体处理组以蓝光(2000±500)Lux照射RPE细胞12 h建立光损伤模型;hUCMSC外泌体处理组细胞培养液中分别加入25、50、75 μg/ml的hUCMSC外泌体,并以此分为低浓度、中浓度、高浓度3个亚组。各浓度亚组继续培养8、16、24 h结束培养。采用Western blot及免疫荧光检测各组RPE细胞VEGF-A蛋白表达,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组RPE细胞VEGF-A mRNA表达。 结果透射电子显微镜观察发现,hUCMSC外泌体为圆形或椭圆形膜性小囊泡,直径50~100 nm。Western blot检测结果显示,hUCMSC外泌体表达外泌体表面特异性标志蛋白CD63及hUCMSC表面蛋白CD90。Western blot及RT-PCR检测结果显示,光损伤组RPE细胞VEGF-A蛋白及mRNA表达较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(t=-16.553、-19.456,P < 0.05)。hUCMSC外泌体处理组RPE细胞培养8、16、24 h时,低浓度、中浓度、高浓度亚组RPE细胞与光损伤组RPE细胞相比,VEGF-A蛋白及mRNA表达均有下降,差异均有统计学意义(P < 0.05)。随hUCMSC外泌体作用时间延长及作用浓度增强,RPE细胞VEGF-A蛋白及mRNA下调作用越强(P < 0.05)。免疫荧光检测结果显示,相同作用时间随着hUCMSC外泌体作用浓度提高,VEGF-A蛋白表达不断下降。 结论hUCMSC外泌体能够有效降低蓝光损伤后人RPE细胞VEGF-A的表达,其效应与hUCMSC外泌体作用浓度、时间呈正相关。

    发表时间:2016-11-25 01:11 导出 下载 收藏 扫码
  • 人脐带间充质干细胞对高糖环境中恒河猴视网膜血管内皮细胞的免疫调节作用

    目的观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)对高糖培养的恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A细胞)的免疫调节作用。 方法利用复合培养体系将hUCMSC加入Transwell系统上层小室,下室加入含有25 mmol/L的葡萄糖及RF/6A细胞;将hUCMSC按照1:1比例与RF/6A细胞共培养。实验分为对照组、高糖组及hUCMSC与高糖共培养组进行,3组RF/6A细胞分别采用Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)/F12完全培养液、DMEM/25 mmol/L D-葡萄糖完全培养液、hUCMSC与25 mmol/L D-葡萄糖完全培养液进行培养。采用噻唑蓝比色法检测共培养后RF/6A细胞的增生活力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RF/6A细胞中叉头蛋白(Foxp3)的相对表达量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中白细胞介素(IL)-17的浓度。 结果培养后第1天,对照组、高糖组及hUCMSC与高糖共培养组RF/6A细胞存活率比较,差异无统计学意义(F=0.030,P > 0.05)。培养后第3、7天,高糖组RF/6A细胞存活率较对照组明显降低,差异有统计学意义(t=36.072、27.890,P < 0.05);hUCMSC与高糖共培养组RF/6A细胞存活率较高糖组明显提高,差异有统计学意义(t=13.280、19.650,P < 0.05)。Western blot检测结果显示,培养后第7天,高糖组RF/6A细胞中Foxp3蛋白相对表达量较对照组明显下降,差异有统计学意义(t=7.826,P < 0.05);hUCMSC与高糖共培养组RF/6A细胞中Foxp3蛋白相对表达量较高糖组明显提高,差异有统计学意义(t=19.936,P < 0.05)。ELISA检测结果显示,培养后第7天,高糖组、hUCMSC与高糖共培养组细胞培养上清液中IL-17浓度较对照组明显升高,差异有统计学意义(F=1 267.503,P < 0.05)。hUCMSC与高糖共培养组细胞培养上清液中IL-17浓度较高糖组明显下降,差异有统计学意义(t=17.386,P < 0.05)。 结论hUCMSC能提高被高糖抑制的RF/6A细胞增生活力,可通过调控Foxp3、IL-17表达来平衡修复RF/6A细胞。

    发表时间:2016-11-25 01:11 导出 下载 收藏 扫码
  • 氧化应激下视网膜色素上皮细胞外泌体对视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子A及丝氨酸/苏氨酸激酶表达的影响

    目的 观察氧化应激下视网膜色素上皮细胞(RPE)外泌体对RPE细胞血管内皮生长因子(VEGF)-A 及丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)表达的影响。 方法 培养人RPE(ARPE-19)细胞,细胞培养基中加入浓度为2.5 μmol/L鱼藤酮诱导ARPE-19细胞发生氧化应激损伤。收集上清液,采取梯度超速离心法分离纯化外泌体。应用透射电子显微镜观察外泌体形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测 ARPE-19 细胞外泌体表面特异性标志蛋白CD63的表达。将氧化应激下ARPE-19细胞外泌体与ARPE-19细胞共培养作为实验组,等量正常RPE细胞外泌体与ARPE-19细胞共培养作为对照组。采用噻唑蓝比色法检测ARPE-19细胞的细胞活力,以酶联免疫检测仪测量波长570 nm处各孔的吸光度[A,旧称光密度(OD)]值表示;免疫荧光染色法和Western blot检测ARPE-19细胞VEGF-A、Akt 蛋白表达;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测ARPE-19细胞VEGF-A、Akt mRNA表达。 结果 透射电子显微镜观察发现,ARPE-19细胞外泌体呈圆形或椭圆形膜性小囊泡,直径50~150 nm。Western blot检测结果显示,ARPE-19细胞外泌体表面表达特异性标志蛋白CD63。噻唑蓝比色法结果显示,实验组、对照组ARPE-19细胞在波长570 nm处的A 值分别为0.582±0.015、0.787±0.032。实验组ARPE-19细胞在波长570 nm处的A 值较对照组明显降低,差异有统计学意义(t=20.886,P<0.05)。免疫荧光染色法检测结果显示,与对照组比较,实验组ARPE-19细胞VEGF-A蛋白表达明显增强,Akt蛋白表达明显减弱。Western blot 检测结果显示,与对照组比较,实验组ARPE-19细胞VEGF-A蛋白相对表达量明显升高,Akt蛋白相对表达量明显降低,差异均有统计学意义(t=3.822、6.527,P<0.05)。RT-PCR 检测结果显示,与对照组比较,实验组ARPE-19细胞VEGF-A mRNA相对表达量明显升高,Akt mRNA 相对表达量明显降低,差异均有统计学意义(t=8.805、−7.823,P<0.05)。 结论 氧化应激下ARPE-19细胞外泌体可抑制正常AREP-19细胞增生,上调VEGF-A表达,下调 Akt 表达。

    发表时间: 导出 下载 收藏 扫码
共2页 上一页 1 2 下一页

Format

Content